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采用殼聚糖-三聚磷酸酯-百里香納米顆粒經(jīng)熱噴墨打印而成的新型活性包裝材料——結(jié)果與討論

來(lái)源:Unisense 瀏覽 1697 次 發(fā)布時(shí)間:2021-09-13


結(jié)果與討論


3.1.適用于印刷納米顆粒的薄膜的機(jī)械性能


表1顯示了在兩種不同濃度(1%和2%w/v)下獲得的Qo薄膜和由Qos與EPQ的不同共混物制備的混合薄膜的機(jī)械性能。Qo薄膜和混合薄膜沒(méi)有顯著差異(p<0.05)厚度(約200微米)。1.5%(w/v)Qo薄膜的%E(51.3±1.7%)明顯高于2.0%(w/v)Qo薄膜(45.9%±1.6);然而,TS值不受影響(分別為14.4±0.9 MPa和15.4±1.8 MPa)。


據(jù)報(bào)道,由高分子量Qo制備的薄膜具有高TS值。這些高TS值歸因于成膜時(shí)Qo分子的高線(xiàn)性排列,這是由于聚合物的羥基和氨基與用作溶劑的水之間的氫鍵產(chǎn)生的分子內(nèi)和分子間相互作用(Butler,Vergano,Testin,Bunn,&Wiles,1996;Caner,Vergano,&Wiles,1998;Muzzarelli,1977)。


對(duì)于混合膜,只有Qo/EPQ質(zhì)量比為90:10(12.8±0.5 MPa)的混合物的TS值與Qo膜相似。對(duì)于Qo/EPQ的其他質(zhì)量比,TS值隨著混合物中EPQ比例的增加而成比例地減?。ó?dāng)Qo/EPQ為50:50時(shí)高達(dá)8.0倍)。這些結(jié)果與之前的報(bào)道一致,即Qo薄膜的機(jī)械強(qiáng)度隨著混合物中蛋白質(zhì)分?jǐn)?shù)的增加而降低(Abugoch等人,2011年;Pereda、Aranguren和Marcovich,2008年;Valenzuela等人,2013年)。


觀(guān)察到混合膜的%E的兩種類(lèi)型的行為。當(dāng)EPQ在混合物中的比例在10%到30%之間時(shí),隨著EPQ在混合物中比例的增加,%E顯著降低。這種效果歸因于藜麥蛋白的氨基酸破壞了檸檬酸和Qo(檸檬酸Qo)之間的相互作用(相對(duì)于Qo檸檬酸鹽的薄膜降低了%E)。這種相互作用的中斷降低了檸檬酸的增塑作用(Olsson、Johansson和J€arnstr€om,2014年)。該結(jié)果也與Khan、Peh和Chang(2000)報(bào)道的結(jié)果一致,他們觀(guān)察到由于檸檬酸的增塑作用,使用檸檬酸制備的Qo薄膜的機(jī)械性能優(yōu)于使用乳酸或乙酸制備的薄膜。.檸檬酸的增塑作用歸因于親液陰離子或結(jié)構(gòu)締造劑的性質(zhì),它們加強(qiáng)了水和Qo之間的氫鍵網(wǎng)絡(luò),有助于薄膜的分子內(nèi)和分子外穩(wěn)定性(Lopez-Leon、Ortega-Vinuesa,Bastos-Gonzalez,&Elaissari,2014)由于檸檬酸在Hofmeister系列中的高鹽析效應(yīng)(Yamaguchi、Iizuka、Osaka、Monma和Tanaka,2003年)。


隨著EPQ含量從40%增加到50%,E%增加了大約2.5倍,這很可能是由于在電離Qo的氨基和藜麥蛋白的自由基之間形成了聚電解質(zhì)復(fù)合物(通過(guò)氫鍵穩(wěn)定)(Abugoch等人,2011年)。


表1殼聚糖薄膜(Qo)和Qo/EPQ混合物(Qo/EPQ)薄膜的機(jī)械性能。不同字母表示差異顯著(p<0.05)。

需要低自粘性以促進(jìn)薄膜處理。最大剝離力(MDF)用作衡量薄膜自粘力的指標(biāo)。隨著Qo的濃度從1.5%w/v(1.7±0.1 N)增加到2.0%w/v(2.4±0.1 N),Qo薄膜的MDF顯著增加。對(duì)于混合膜,MDF值明顯高于Qo膜。這些值隨著混合物中EPQ比例的增加而增加(20%EPQ為4.6±0.4 N,混合物中50%EPQ為6.2±0.5 N)。這種增加可能歸因于薄膜的含水量,這影響了親水薄膜的粘附性。Qo薄膜的水分含量(14.7±0.7%)明顯低于Qo/EPQ薄膜(17.5±0.6)。此外,據(jù)報(bào)道,伯胺(賴(lài)氨酸部分的)和蛋白質(zhì)的硫醇基團(tuán)(SH)與Qo的氨基之間的相互作用增加了由Qo和蛋白質(zhì)形成的水凝膠的粘附性(Bouten等人,2014)。


在模擬漿果儲(chǔ)存的條件下(室在0冷凝和85%RH)下評(píng)估薄膜的吸水行為7天。與Qo薄膜(1.5%和2.0%w/v)相比,混合薄膜(90:10)的保水性(g水/g干膜)增加了3.0倍。對(duì)于Qo/EPQ薄膜,EPQ百分比從20%到50%不等,觀(guān)察到更高的保水率,高達(dá)75%。這種保水性的增加可歸因于兩種薄膜中存在的可電離基團(tuán)比例的差異。由于藜麥蛋白氨基酸的自由基基團(tuán)的電離(Abugoch,2009)和制備成膜溶液的pH值(pH 3.5),混合膜具有更多的電荷。在此pH值下,去質(zhì)子化谷氨酸(pKR 4.25)和天冬氨酸(pKR 3.65)的羧基(eCOOe)和精氨酸(pKR 12.48)、組氨酸(pKR 6.00)和.5KR賴(lài)氨酸(pKR 6.00)的質(zhì)子化胺基(NH3+))主要存在(Nelson&Cox,2006,chap.3)。因此,與Qo膜相比,由于唐南平衡,混合膜將表現(xiàn)出更大的水分子向蛋白質(zhì)-多糖復(fù)合物內(nèi)部的擴(kuò)散(Davis,Yezek,Pinheiro,&van Leeuwen,2005;Freudenberg,Zimmermann,Schmidt,Holger Behrens,&Werner,2007)。在Qo膜中質(zhì)子化的自由基較少,因此電滲唐南電位的影響降低,因?yàn)榫酆衔镦溞纬捎行?、緊湊、緊密堆積的結(jié)構(gòu),留下較小的體積可用于與水分子相互作用(Caner et al.,1998;Wiles、Vergano、Barron、Bunn和Testin,2000)。


選擇1.5%(w/v)Qo薄膜和90:10的Qo/EPQ比率進(jìn)行打印,因?yàn)樗鼈兊臋C(jī)械性能(TS、%E和MFD)適合在打印機(jī)中使用(意味著對(duì)打印機(jī)沒(méi)有可見(jiàn)的損壞)由于印刷裝置產(chǎn)生的牽引力而導(dǎo)致印刷薄膜的結(jié)構(gòu))。此外,這些薄膜所表現(xiàn)出的吸水量減少將允許它們用作新鮮水果儲(chǔ)存的包裝材料。


3.2.NQoThs的制備和表征


表2顯示添加20%甘油(v/v)導(dǎo)致表面張力和運(yùn)動(dòng)粘度值類(lèi)似于商業(yè)油墨溶液報(bào)告的值(de Gans、Duineveld和Schubert,2004年;Khan等人,2010年)。這確保了打印頭真空產(chǎn)生的液體的快速更換,從而防止紙基質(zhì)過(guò)度滴落或潤(rùn)濕(Kipphan,2001)。


基于納米顆粒相對(duì)于不含甘油的NQoTh分散體的尺寸變化(z平均值)和z電位,評(píng)估了添加甘油(20e30%v/v)對(duì)NQoThs分散體性質(zhì)的影響.


含20%(v/v)甘油的NQoThs的z電位(42.1±4.84 mV)顯著高于含30%(v/v)甘油的NQoThs(37.3±2.71 mV)。添加30%(w/v)甘油后,多分散指數(shù)(PDI)增加了約25%。


這些結(jié)果表明,甘油與溶液中的NP相互作用,使表面免受電荷的影響,降低了zeta電位,降低了顆粒之間的靜電排斥,誘導(dǎo)了團(tuán)聚,從而增加了顆粒的尺寸和PDI。Khoee、Sattari和Atyabi(2012)報(bào)道甘油誘導(dǎo)NP之間的聚結(jié)。相比之下,Müller、Jacobs和Kayser(2001)證明了具有30 mV電位和PDI小于0.7的NPs是穩(wěn)定和功能性的;因此,在研究范圍內(nèi)添加甘油不會(huì)影響NQoThs的穩(wěn)定性。


含30%(w/v)甘油(417.4±53.1 nm)的NP的Z平均值比含20%(w/v)甘油(383.8±58.8 nm)的NP觀(guān)察到的高25%。尺寸通過(guò)TEM顯微鏡確定。圖1顯示了在沒(méi)有甘油(圖1A)和添加20%(w/v)甘油(圖1B)的情況下NQoThs的顯微照片。如上所述,添加20%甘油抑制了NP團(tuán)聚。表2比較了TEM和動(dòng)態(tài)光散射(DLS)確定的NP尺寸。使用DSL確定的值比TEM確定的值高近10倍,因?yàn)門(mén)EM直接測(cè)量干燥樣品,而Zetasizer系統(tǒng)確定尺寸首先通過(guò)DLS測(cè)量樣品中由于周?chē)W愚Z擊(布朗運(yùn)動(dòng))而引起的液體中粒子的隨機(jī)運(yùn)動(dòng),然后使用StokeseEinstein方程(Akbari、Pirhadi和Zandrahim,2011年)從該運(yùn)動(dòng)中推斷出大小。


3.3.通過(guò)熱注射打印納米顆粒


將Th摻入Qo膜的結(jié)果如表3所示。隨著印刷NQoTh層數(shù)的增加(在膜的同一側(cè)印刷1到4次),兩種膜中的Th量都增加了。在Qo膜中,隨著分散體中分別加入20%和30%的甘油(v/v),Th從0.07增加到0.22 mg/cm3和從0.06增加到0.15 mg/cm3。Th濃度的這種增加是顯著的(隨著印刷層數(shù)的增加,薄膜增加了3.14倍)。類(lèi)似地,在Qo/EPQ薄膜中,從第一次印刷到第四次印刷,Th增加了31e33%(從0.05到0.16 mg/cm3,從0.03到0.09 mg/cm3,使用20%和30%的甘油(v/v)NQoTh分散體)。當(dāng)應(yīng)用更多印刷層時(shí),分散體從20%和30%甘油NQoTh分散體中滴落。


使用20%甘油(v/v)可獲得更高的Th分散結(jié)合效率;Qo薄膜為7.54%,Qo/EPQ薄膜為5.54%。這些值分別比使用30%甘油(v/v)獲得的效率高20%和35%。


這是在Qo薄膜中使用這種技術(shù)摻入活性劑的第一份報(bào)告。布安茲等人。(2011)報(bào)告稱(chēng),使用HP D1660打印機(jī)型號(hào)(最大分辨率為4800*1200 dpi),沙丁胺醇醋酸纖維素片材(A4透明膠片)的摻入效率更高,為85%。在Qo和Qo/EPQ薄膜中摻入Th的效率低可歸因于用于印刷的基質(zhì)的特性和/或印刷設(shè)備的低分辨率(600 dpi)。另一個(gè)重要因素是打印頭和打印表面之間的距離。為了減少這個(gè)距離,Mel?endez等人。(2008)使用增強(qiáng)型Alfaglas®,一種涂有惰性特氟龍的商用聚四氟乙烯(PTFE)薄膜,以減少印刷過(guò)程中的活性損失。


表2甘油對(duì)納米顆粒懸浮液物理性質(zhì)和納米顆粒的粒徑和zeta電位的影響。不同字母表示顯著差異(p<0.05)。

圖1.TEM顯微照片NQoTh懸浮液。(A)NPs的分散和(B)添加了甘油(20%w/v)的Nps分散。

表3注射到薄膜Qo和Qo/EPQ中的百里酚量(mg/cm3)作為印刷次數(shù)的函數(shù)。不同字母表示顯著差異(p<0.05)。

另一個(gè)考慮因素是來(lái)自打印頭的液滴與打印矩陣之間的接觸角。圖2顯示了在Qo和Qo/EPQ薄膜表面上的2 mL滴含有20%和30%(v/v)甘油的NQoTh分散體的接觸角。含有20%甘油(v/v)的NQoTh分散體表現(xiàn)出更高的接觸角,為85.11?和55.69?分別對(duì)于Qo和Qo/EPQ薄膜,而對(duì)于含有30%(v/v)甘油的懸浮液,接觸角降低至69.16?和47.50?分別在Qo和Qo/EPQ薄膜中。隨著甘油濃度的增加,接觸角的減小歸因于當(dāng)甘油濃度從20%v/v增加到30%v/v時(shí),分散體的表面張力從49.3 mN/m增加到53.1 mN/m(參見(jiàn)表2)。因此,在兩種薄膜中摻入Th的效率與接觸角成比例增加。這些結(jié)果與Genina等人的結(jié)果一致。(2013),他檢查了用甲磺酸雷沙吉蘭(RM)印刷的3種材料:多孔復(fù)印紙、防水透明醋酸纖維素(A4)和由羥丙基甲基纖維素/交聚維酮制備的口腔分散膜(與本工作中研究的膜最相似).他們獲得了69.0°、61.4°的接觸角。和34.4?,分別??谇豢煞稚⒛さ腞M比透明醋酸纖維素(A4)低25%,RM比多孔復(fù)制基質(zhì)小50%。

圖2.在Qo膜(上)和Qo/EPQ(下)之間由添加了20%和30%(v/v)的甘油的液滴NQoTh分散體形成的接觸角。


3.4.顯微結(jié)構(gòu)


Qo和Qo/EPQ的印刷膜示于圖3A和F。圖3B示出了Qo膜的橫截面,圖3G示出了EPQ/Qo膜的橫截面。Qo膜具有均勻、柔軟、光滑、連續(xù)的結(jié)構(gòu),具有良好的完整性和孔隙。相比之下,混合膜具有帶有孔隙和裂縫的異質(zhì)結(jié)構(gòu)。Qo-乳清蛋白薄膜(Kurek、Galus和Debeaufor,2014年)和Qo-明膠薄膜(Kurek等人,2012年;Rivero、García和Pinotti,2009年;Torres、Aimoli、Beppu和弗雷利希,2005年)。這些作者將這些由碳水化合物和蛋白質(zhì)混合物制備的薄膜的異質(zhì)結(jié)構(gòu)歸因于干燥過(guò)程(溶劑前沿的遷移)。Qo/EPQ薄膜的干燥時(shí)間是Qo薄膜的1.8倍,表明水分子通過(guò)混合薄膜的擴(kuò)散速度較慢。此外,混合物的pH值(pH 3.8)接近藜麥蛋白的等電點(diǎn)(Abugoch,Romero,Tapia,Rivera,&Silva,2008),這可能會(huì)引發(fā)復(fù)雜的凝聚和某些蛋白質(zhì)組分的沉淀,導(dǎo)致Ferreira等人描述的熱力學(xué)不相容性。(2009),當(dāng)乳清蛋白和Qo的混合物被酸化以獲得混合膜時(shí),他觀(guān)察到了這種現(xiàn)象。


Qo膜的表面(圖3D)光滑平整,沒(méi)有孔隙或裂縫。幾位作者報(bào)告了Qo薄膜的高度結(jié)構(gòu)同質(zhì)性(Abugoch等人,2011年;Fern?andes、Freire、Silvestre、Neto、Gandini等人,2010年;Valenzuela等人,2013年;Vargas、Albors、Chiralt和


圖 3. 加入的 NQoTh 熱噴墨薄膜的圖片和 SEM 顯微照片。  上:Qo噴墨薄膜(A)圖片Qo噴墨薄膜,(B)和(C)Qo薄膜橫截面;  (D) 和 (E) 上表面。  下圖:Qo/EPQ

噴墨薄膜(F)圖片 Qo/EPQ 噴墨薄膜,(G)和(H)截面;  (I) 和 (J) 上表面。



與Qo膜(圖3C)相比,混合膜的孔隙率使NQoThs分布更深(圖3H)。在表層,NQoThs主要聚集在打印設(shè)備的面板上(圖3E和J)。印刷的NQoThs在兩種薄膜的內(nèi)部和表面都保留了它們的球形形狀和明確的幾何形狀。

圖4.(A)Qo薄膜控制和Qo NQoTh 11薄膜和(B)Qo/EPQ薄膜控制和Qo/EPQ NQoTh薄膜的X射線(xiàn)衍射曲線(xiàn)和結(jié)晶度(%)。


3.5.X射線(xiàn)衍射


圖4顯示了Qo薄膜、印有NQoThs的Qo薄膜(圖4A)、Qo/EPQ薄膜和印有NQoThs的Qo/EPQ薄膜(圖4B)的衍射圖。Qo薄膜是半結(jié)晶的,在19.8?處顯示出一個(gè)峰值,這是Qo薄膜的典型特征(Zhong、Song和Li,2011)。Qo膜還在29.3度處出現(xiàn)峰值,這對(duì)應(yīng)于檸檬酸(Valenzuela等人,2013年)。Qo/EPQ薄膜在20.0度和29.4度處表現(xiàn)出尖銳、明確的峰,比Qo薄膜中觀(guān)察到的峰更強(qiáng)烈。Qo/EPQ薄膜還在35.9度、39.4度、43.2度和47.5度處出現(xiàn)衍射峰,表明藜麥蛋白和Qo之間存在分子間相互作用(Valenzuela等,2013)。


印有NQoThs的Qo薄膜在39.4?和57.3?,分別對(duì)應(yīng)于檸檬酸和Th(數(shù)據(jù)未顯示)。在印有NQoThs的Qo/EPQ薄膜中也觀(guān)察到后者。這兩個(gè)新峰與兩種類(lèi)型薄膜上納米顆粒的表面沉積物有關(guān),與SEM觀(guān)察結(jié)果一致(見(jiàn)圖3B和F)。


Qo和Qo/EPQ薄膜以及兩種印刷NQoThs薄膜的結(jié)晶和非晶百分比如圖4所示。值得注意的是,在具有NQoThs的Qo和Qo印刷薄膜(14.5和14.4)中沒(méi)有觀(guān)察到結(jié)晶度百分比的差異%,分別)。Qo/EPQ薄膜(15.8%)與印有NQoThs的Qo/EPQ薄膜(15.6%)之間的結(jié)晶度百分比差異不顯著。這些結(jié)果表明兩種薄膜的結(jié)晶度都不受NQoThs印刷的影響。這一結(jié)果與之前的報(bào)道一致,即通過(guò)噴霧、真空冷凍干燥或通過(guò)攪拌摻入成膜淀粉分散溶液中產(chǎn)生的淀粉NPs阻止了含有NPs的薄膜結(jié)晶區(qū)域的形成(Shi,Wang,Li和Adhikari,2013年)。


3.6.NQoThs印刷薄膜儲(chǔ)存后的機(jī)械性能和WVP


在儲(chǔ)存前后測(cè)量了印有4層NQoThs的薄膜的機(jī)械性能和WVP,這些結(jié)果如表4所示。


在冷室中儲(chǔ)存30天顯著增加了薄膜的%E斷裂伸長(zhǎng)率,而機(jī)械強(qiáng)度(TS)顯著降低。這些影響歸因于在這些條件(85%RH)下從薄膜中增加的水吸收以及隨之而來(lái)的對(duì)薄膜增塑劑的影響。


對(duì)薄膜類(lèi)型(Qo和Qo/EPQ)、NP的摻入(對(duì)照/NQoTh)以及儲(chǔ)存時(shí)間在0?和85%RH(0天和30天)作為主要因素,%E和TS作為響應(yīng)變量。所有主要因素顯著影響薄膜的%E如下:a)Qo薄膜的伸長(zhǎng)率比Qo/EPQ薄膜高18%;b)NQoThs的添加使%E降低了7%;c)在冷室中的儲(chǔ)存時(shí)間使%E增加了40%。此外,這兩種互動(dòng),電影的類(lèi)型?添加NP和添加NP?存儲(chǔ)時(shí)間,意義重大。影片的互動(dòng)類(lèi)型?詳細(xì)檢查了NPs的添加(圖5)。加入NQoThs后,Qo薄膜的%E(見(jiàn)圖5A)下降了75%,而Qo/EPQ薄膜的%E增加了8.2%。在印刷NQoThs后,Qo薄膜的TS降低了3.0%,而NQoThs的添加使Qo/EPQ薄膜的TS值增加了66%(見(jiàn)圖5B)。這些差異可能歸因于Qo和Qo/EPQ薄膜之間的微觀(guān)結(jié)構(gòu)差異(圖3)。Qo/EPQ薄膜是異質(zhì)和多孔的,這將允許NQoThs更深地結(jié)合到微觀(guān)結(jié)構(gòu)中。相比之下,Qo薄膜具有均勻致密的微觀(guān)結(jié)構(gòu),因此NQoThs只能印刷在薄膜表面。


沒(méi)有NQoThs的Qo和Qo/EPQ薄膜在85%RH和0降溫下的WVP值沒(méi)有顯著差異(p>0.05)。通過(guò)印刷添加4層NPs后,Qo薄膜的WVP降低了33%,混合薄膜的WVP降低了13.3%。WVP的這種降低是由于添加NP導(dǎo)致系統(tǒng)曲折增加(Adame和Beall,2009年;Clapper等人,2008年)。


3.7.抗菌活性


將NQoThs納入電影的主要目標(biāo)是增強(qiáng)兩種類(lèi)型電影中的Qo的AM。據(jù)報(bào)道,Qo的AM取決于內(nèi)在因素,例如脫乙酰度、狀態(tài)(溶液或薄膜)和分子量。后一個(gè)特征是最相關(guān)的特征之一。Kong、Chen、Xing和Park(2010)證明,當(dāng)使用更高分子量的Qo(Dutta、Tripathi、Mehrotra和Dutta,2009年)時(shí),AM會(huì)顯著降低(高達(dá)95%)。此外,當(dāng)Qo與其他聚合物(如蛋白質(zhì)和/或脂質(zhì))結(jié)合時(shí),Qo的AM會(huì)降低(Rabea等,2003)。因此,為了克服這些限制,將用QoLMW制備并負(fù)載Th(一種已知的抗菌化合物)的NP添加到薄膜中。


圖5.Type Film和NQoTh之間的相互作用(A)斷裂伸長(zhǎng)率效應(yīng)和(B)拉伸強(qiáng)度效應(yīng)。

表4儲(chǔ)存30天后通過(guò)4層熱噴墨摻入和未摻入NQoTh的薄膜的機(jī)械性能和水蒸氣滲透性能。不同字母表示顯著差異(p<0.05)。

表5儲(chǔ)備溶液NQoTh和Qo/Th混合物的分散對(duì)本研究中使用的微生物的添加劑或協(xié)同效應(yīng)的定量評(píng)估。

Th和QoLMW的最低抑制濃度(MIC)是針對(duì)本研究中測(cè)試的每個(gè)菌株獨(dú)立確定的:在鼠傷寒沙門(mén)氏菌、大腸桿菌和產(chǎn)氣大腸桿菌中,Th為0.250 g/L,QoLMW為1.0 g/L;L.innocua中Th為0.275 g/L,QoLMW為0.8 g/L;銅綠假單胞菌中Th為0.225 g/L,QoLMW為1.0 g/L;金黃色葡萄球菌中Th為0.275 g/L,QoLMW為1.0 g/L。這些濃度與Guarda等人報(bào)告的濃度相似。(2011)為T(mén)h和Goy、de Britto和Assis(2009)為QoLMW。


將NQoTh納米顆粒分散體的AM與用于制造NP(QoLMW/Th的混合物)的儲(chǔ)備溶液的AM進(jìn)行比較。對(duì)于所有測(cè)試的微生物,NQoThs對(duì)微生物的活力表現(xiàn)出強(qiáng)大的影響,在NQoThs的原液分散體稀釋90%時(shí)實(shí)現(xiàn)了生長(zhǎng)抑制。對(duì)于S.typhimurium、E.coli和E.aerogenes,QoLMW/Th溶液的60%稀釋會(huì)抑制微生物的活力。銅綠假單胞菌、無(wú)害乳桿菌和金黃色葡萄球菌在80%(v/v)稀釋時(shí)被NQoThs抑制,而QoLMW/Th溶液需要60%(v/v)稀釋。


本研究的一個(gè)目標(biāo)是確定對(duì)微生物的影響是否是由于組分的協(xié)同或相加作用。通過(guò)根據(jù)NQoThs中存在的百分比(QoLMW為75%,Th為25%)對(duì)QoLMW和Th的MIC進(jìn)行加權(quán),將NQoThs的MIC與附加效應(yīng)的估計(jì)值進(jìn)行比較。NPs(NQoTh)和QoLMW/Th原液的MIC值均低于基于組分加和效應(yīng)估計(jì)的MIC,表明Qo和Th之間存在協(xié)同效應(yīng)(見(jiàn)表5)。然而,取決于測(cè)試的細(xì)菌,NPs的MIC比庫(kù)存QoLMW/Th混合物低大約1.5到4.5倍。Wazed Ali、Rajendran和Joshi(2011)評(píng)估了使用TPP從440-kDa Qo的1.0%(w/v)溶液中產(chǎn)生的NQo(115.5 nm)的AM抗金黃色葡萄球菌。NQo比Qo原液更有效地抑制這些細(xì)菌的生長(zhǎng)50%。


還評(píng)估了印有NQoThs的薄膜的AM。薄膜與上述指定的細(xì)菌菌株在37℃下孵育24小時(shí)。結(jié)果列于表6中。用NQoThs印刷的Qo薄膜表現(xiàn)出比對(duì)照薄膜更大的AM,證明了薄膜中Th的釋放以及Qo和Th的協(xié)同效應(yīng)。與對(duì)照薄膜相比,用NQoThs印刷的混合薄膜也表現(xiàn)出AM的增加。對(duì)于所有菌株,印有NQoThs的Qo薄膜產(chǎn)生更大的抑制區(qū),這可歸因于NQoThs在基質(zhì)中的排列和位置以及薄膜中更大的Th負(fù)載(圖3和6A)。在所有微生物測(cè)試中,NQoThs對(duì)革蘭氏陰性菌株的活性高于革蘭氏陽(yáng)性菌株。這種效應(yīng)很可能是由于外膜和脂多糖中存在的脂肪酸和磷酸鹽的負(fù)電荷(Du、Niu、Xu、Xu和Fan,2009年;Kong等人,2010年)。


3.8.從薄膜中釋放Th由于難以確定活性劑從復(fù)雜基質(zhì)中的釋放,因此可以在水中評(píng)估活性成分的釋放,以模擬飽和蒸汽室中新鮮水果的儲(chǔ)存條件(0冷凝,85%RH)。多項(xiàng)研究表明,這些類(lèi)型的結(jié)果具有代表性(Brandsch、Mercea、Rüter、Tosa和Piringer,2002年;Grob,2008年;Paseiro-Losada、Simal、Abuín、Lopez和Gandara,1993年;Philo、Fordham、Damant和城堡,1997年)。在這項(xiàng)研究中,通過(guò)在Franz細(xì)胞中的滲透性測(cè)試研究了薄膜中的Th釋放。結(jié)果如圖6所示。在下沉條件下評(píng)估Th從薄膜中的釋放,即在活性劑的濃度低于其水溶性的10%(1000 ppm在25℃下),通過(guò)應(yīng)用能斯特和布倫納定律(Ely、Garcia和Thommes,2014年)。


表6通過(guò)熱噴墨將NQo和NQoTh結(jié)合到Qo和Qo/EPQ薄膜中的徑向擴(kuò)散的生長(zhǎng)抑制區(qū)(mm2)。對(duì)于每種納米顆粒溶液,薄膜印刷4次。不同字母表示顯著差異(p<0.05)。

圖6.從使用NQoTh印刷4次的薄膜Qo和Qo/EPQ中釋放百里酚(A)0天(初始負(fù)載Th)、第1天和第8天的釋放曲線(xiàn)和(B)室溫下8天測(cè)定的百里酚釋放動(dòng)力學(xué)溫度。

圖6A顯示了用Qo(0.22±0.01 mg/cm3)和Qo/EPQ(0.16±0.01 mg/cm3)印刷的薄膜中Th的初始電荷。24小時(shí)后(第1天),Qo膜釋放0.11±0.004 mg Th/cm3,而混合膜釋放0.01±0.002 mg Th/cm3。在測(cè)試結(jié)束時(shí)(第8天),兩種薄膜都釋放了薄膜中印刷的所有Th。圖6B顯示了在室溫下進(jìn)行的8天測(cè)試期間,兩種薄膜中Th(%)的不同釋放動(dòng)力學(xué)。Qo薄膜在前24小時(shí)內(nèi)經(jīng)歷了Th的快速釋放(Th的51.1±2.2%)。在第2天,主動(dòng)釋放遵循持續(xù)的指數(shù)行為,釋放率為75.8±1.9%。測(cè)試72小時(shí)后,這些薄膜中Th的釋放變得緩慢且受控(78.8±2.2%),并保持恒定,直到第8天達(dá)到100%Th釋放。相比之下,混合膜表現(xiàn)出延遲的Th釋放動(dòng)力學(xué)。在最初的24小時(shí)和48小時(shí)內(nèi),Qo/EPQ薄膜分別釋放了3.5±1.7%和6.5±1.7%的Th,比Qo薄膜低(平均)約13倍?;旌夏さ尼尫旁诘谌煸黾拥?7.2±4.0%,第四天呈指數(shù)分布,釋放率為67.9±6.1%。第4天后,如在Qo薄膜中所觀(guān)察到的,Qo/EPQ薄膜在第8天之前表現(xiàn)出緩慢的受控釋放。釋放曲線(xiàn)的差異可歸因于薄膜中印刷的NQoThs的位置。通過(guò)SEM觀(guān)察,Qo薄膜中的NPs積聚在表面并且更容易接觸到水。相比之下,混合膜(由于它們的孔隙率)允許NQoThs更大程度的內(nèi)化,因此降低了NPs對(duì)溶劑的可及性。這些結(jié)果與我們的微生物測(cè)試一致,證明用NQoThs印刷的Qo薄膜比混合薄膜具有更高的AM。



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